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CRISPR/Cas9載體構建產品
CRISPR/Cas9技術簡介
CRISPR/Cas系統是在大多數細菌(40%)和古細菌(90%)中發現的一種天然免疫系統,可用來對抗入侵的病毒及外源DNA。
CRISPR指的是規律成簇的間隔短回文重復(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats)。 Cas(CRISPR-associated genes)為CRISPR相關基因。
當噬菌體感染細菌后,病毒DNA進入細菌細胞,細菌細胞表達Cas復合體對噬菌體DNA進行切割得到間隔序列,間隔序列在cas1 和cas2作用下插入到CRISPR最前端形成免疫。
2013年1月,在Science上發表了兩篇以鏈球菌CRISPR/Cas9系統為基礎對哺乳動物細胞進行基因組編輯新方法,利用一條gRNA(guid RNA)模擬成熟的 crRNA-tracrRNA復合體與Cas9共同作用切割靶基因組(如下圖),由此揭開了該技術的運用高潮。
吉瑪基因的提供多種Cas9表達載體,可同時表達Cas9與gRNA(1個,2個),并含有抗性基因或熒光基因,可有效富集轉染細胞,提高基因編輯效率,相關載體都經過驗證,具有高效基因編輯效率。
載體編號及名稱
規格
完成周期
備注
pGE-1(pU6gRNA)
50μg
10個工作日
單gRNA
pGE-2(pU6gRNACas9puro)
50μg
10個工作日
單gRNA+Cas9,并帶有抗性基因
pGE-3(pU6gRNACas9EGFP)
50μg
10個工作日
單gRNA+Cas9,并帶有熒光
pGE-4(pU6gRNA1U6gRNA2Cas9puro)
50μg
10個工作日
雙gRNA+Cas9,并帶有抗性基因
pGE-5(pU6gRNA1U6gRNA2Cas9EGFP)
50μg
10個工作日
雙gRNA+Cas9,并帶有熒光
pGE-6(pU6gRNACas9)
50μg
10個工作日
單gRNA+Cas9
吉瑪基因Cas9載體圖譜如下:
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Chuan-Le Xiao, Song Zhu, Minghui He et al. N6-Methyladenine DNA Modification in the Human Genome. Molecular Cell 2018 Jul 19; 71: 306-18.
Tingting Cai, Jieqi Zhou, Yuanyuan Zeng et al. EVI5 is an oncogene that regulates the proliferation and metastasis of NSCLC cells. Molecular Cell 2020 May 11;39:84.
Linbin Yang, Qiang Liu, Xiaoqian Zhang et al. DNA of neutrophil extracellular traps promotes cancer metastasis via CCDC25. Nature 2020 Jun 11;583(7814):133-138.
訂購須知
非套餐基因編輯載體:
客戶提供序列,保證序列構建正確,提供測序結果,不保證編輯效應,無效不予退款。如需驗證,費用需要另行收費。
套餐基因編輯載體(3個或對靶點) 套餐(一個基因3個或3對雙gRAN靶點):
針對人源的三條單gRNA或雙gRNA保證至少有一條在常規細胞如293細胞中有編輯效應(T7核酸內切酶,PCR或測序有一種方法證實即可),如果客戶反饋無效a. 需要提供如下材料(293T轉染效率,檢測具體方法步驟)經公司技術確認可以免費重新構建一次或退票,如已經付款可以做成預付款抵扣公司其他產品或服務;b. 如果重新設計3對再次無效則不再免費重新設計,再次設計需要款到發貨;c. 如果客戶細胞轉染不進去導致無效或者非人源物種,則不再投訴受理范圍;d. Cas9和gRNA均為本公司配套產品,非本公司配套產品不做單獨效果保證。
如果經過公司293T驗證有編輯效應(T7核酸內切酶,PCR或測序有一種方法證實即可),并提供PDF版本驗證結果(驗證結果產權不屬與客戶),客戶如需驗證結果完整服務報告,需要另行支付驗證費用6000元,并支付前期貨款,收到貨款后提交全部原始結果。如果驗證無效,可以免費重新設計3個靶點或退票退款或做預付款。如果再次無效則不再免費重新設計,已經付款做預付款處理。
下單前請務必核對訂購表客戶信息和訂購內容無誤,訂單一經確認,當天即啟動生產。 超過當日17:00后不能修改或者取消,如果需要取消訂單,由此產生的費用,將由客戶承擔。
【取消訂單費用規則】
(1)當日17:00前,免費修改或取消。
(2)當日17:00到次日17:00前,按該項產品金額的50%收取。
(3)次日17:00后,按該項產品金額的100%收取。