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產(chǎn)品描述

RNA干擾技術(shù)已經(jīng)成為研究基因功能的有力工具。任何一個(gè)RNA實(shí)驗(yàn)的成功都有賴于：

1. 高質(zhì)量的siRNA（或shRNA表達(dá)載體） 

2. 有效的轉(zhuǎn)染方法

目前哺乳動(dòng)物轉(zhuǎn)染的常見方法有：磷酸鈣共沉淀、電穿孔法、DEAE-葡聚糖和polybrene、機(jī)械法（例如,顯微注射和基因槍）、陽(yáng)離子脂質(zhì)體試劑，其中陽(yáng)離子脂質(zhì)體試劑轉(zhuǎn)染法是目前最常用的轉(zhuǎn)染方法。
陽(yáng)離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑的選擇對(duì)于利用siRNA介導(dǎo)的基因沉默實(shí)驗(yàn)來(lái)說(shuō)同樣是至關(guān)重要的。沒有高效的轉(zhuǎn)染，就不能有效的引發(fā)相應(yīng)的細(xì)胞響應(yīng)，會(huì)直接影響同一siRNA的抑制效果。只有將siRNA高效轉(zhuǎn)染哺乳動(dòng)物細(xì)胞，才能更真實(shí)的檢測(cè)siRNA干擾基因表達(dá)的效果。
如何選擇最適合的轉(zhuǎn)染試劑和轉(zhuǎn)染條件，往往取決于不同的哺乳動(dòng)物細(xì)胞類型和不同的核酸分子。轉(zhuǎn)染試劑推薦使用GenePharma的轉(zhuǎn)染試劑—GP-transfect-Mate 。

siRNA-Mate plus 轉(zhuǎn)染試劑盒（siRNA/miRNA通用型）是一種新型即用型脂質(zhì)納米轉(zhuǎn)染試劑，適用于多種細(xì)胞類型的siRNA、miRNA（mimics/inhibitor）轉(zhuǎn)染，包括貼壁或懸浮的多種細(xì)胞。

易用：一步即可實(shí)現(xiàn)siRNA/miRNA高效包封，無(wú)需孵育，無(wú)需更換培養(yǎng)基。

高效：通過(guò)細(xì)胞內(nèi)源性轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)染，復(fù)合物室溫穩(wěn)定長(zhǎng)達(dá)8小時(shí)，更適于高通量篩選。

細(xì)胞零壓力：本品不含乙醇，采用生物可降解脂質(zhì)材料對(duì)細(xì)胞影響極小。

GP-transfect-Mate是吉瑪基因最新推出的一種高效能高分子聚合物轉(zhuǎn)染試劑，應(yīng)用于多種細(xì)胞的DNA質(zhì)粒以及siRNA、miRNA oligo的體外轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)。基于該聚合物結(jié)構(gòu)分布一致性高，具有能夠快速、均一性攜帶RNA或DNA等核酸物質(zhì)復(fù)合能力，故可實(shí)觀良好的重復(fù)性、均一性、低毒性的轉(zhuǎn)染效果。與其它轉(zhuǎn)染試劑比較，GP-transfect-Mate轉(zhuǎn)染效率高、細(xì)胞存活率高、毒性小。可廣泛用于瞬時(shí)和相對(duì)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染，有助于蛋白表達(dá)和基因功能的研究。

特點(diǎn)：

功能介紹與實(shí)驗(yàn)實(shí)例

產(chǎn)品介紹?

siRNA-mate plus轉(zhuǎn)染試劑盒（siRNA/miRNA通用型）是基于先進(jìn)的脂質(zhì)納米粒核心技術(shù)專為小片段RNA開發(fā)的全新一代轉(zhuǎn)染試劑。
● 先進(jìn)的脂質(zhì)納米粒（LNP）技術(shù)：這款試劑以LNP技術(shù)為核心，相比傳統(tǒng)陽(yáng)離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑具有顯著優(yōu)勢(shì)；
● 即時(shí)組裝的siRNA-NeoLNP復(fù)合物：依托領(lǐng)先的LNP技術(shù)平臺(tái)，無(wú)需乙醇即可實(shí)現(xiàn)與專業(yè)包封設(shè)備相當(dāng)?shù)陌庑Ч?/span>
● 高效的細(xì)胞內(nèi)遞送：LNP獨(dú)特的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)和內(nèi)體逃逸機(jī)制，實(shí)現(xiàn)高效遞送，釋放siRNA基因靜默潛力；
● 細(xì)胞零壓力：采用的生物可降解、新型可電離脂質(zhì)材料，進(jìn)入細(xì)胞后將迅速代謝，且不含乙醇，對(duì)細(xì)胞的影響極小；
● 適用細(xì)胞種類廣泛：無(wú)懼不同培養(yǎng)基條件的挑戰(zhàn)。

GP-transfect-Mate轉(zhuǎn)染效率高、細(xì)胞存活率高、毒性小。可廣泛用于瞬時(shí)和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染，也可以應(yīng)用于蛋白表達(dá)和基因功能的研究。?
轉(zhuǎn)染試劑保存在 4℃，有效期1年。

重要提示

細(xì)胞的狀態(tài)：轉(zhuǎn)染時(shí)貼壁細(xì)胞的密度以?50%左右為佳，而且轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞應(yīng)處在生長(zhǎng)旺盛的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。細(xì)胞密度過(guò)高和細(xì)胞傳代數(shù)過(guò)高會(huì)影響轉(zhuǎn)染效果。

siRNA的質(zhì)量：使用高純度的siRNA也是轉(zhuǎn)染成功的關(guān)鍵。在轉(zhuǎn)染前需確定siRNA的含量和純度，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要使用DEPC處理過(guò)的耗材和試劑，注意避免RNAse污染。

血清的影響：在制備 siRNA-mate/GP-transfect-Mate? 和 siRNA 形成復(fù)合體過(guò)程中不能添加血清，血清會(huì)影響復(fù)合體形成，建議用OPTI-MEM 或其他無(wú)血清培養(yǎng)基（如 DMEM、RPMI-1640 等）稀釋 siRNA 和轉(zhuǎn)染試劑，以達(dá)到復(fù)合物形成的最佳效果。但是，在隨后的轉(zhuǎn)染過(guò)程中，血清的存在并不影響復(fù)合體的轉(zhuǎn)染效果。使用GP-transfect-Mate 進(jìn)行轉(zhuǎn)染時(shí)，多數(shù)情況下，在完全培養(yǎng)基中進(jìn)行轉(zhuǎn)染，并且轉(zhuǎn)染后不更換培養(yǎng)基有助于獲得更高的轉(zhuǎn)染效率和更低的細(xì)胞毒性。

轉(zhuǎn)染試劑的用量：對(duì)于一定量的siRNA建議嘗試按照推薦劑量的轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化，以確定最佳的轉(zhuǎn)染效率。

GP-transfect-Mate 案例

使用方法

轉(zhuǎn)染的一般性指導(dǎo)

siRNA濃度和用量的一般換算：1OD≈33ug≈2.5nmol? 1OD加125ul的水，得到20uM的濃度。1ul就是20pmol，在1ml細(xì)胞培養(yǎng)液中加1ul（20pmol），那終濃度就是20pmol/ml=20nM。加2ul就是40nM，以此類推。如果按ug計(jì)算，1OD加125ug水溶解后，質(zhì)量濃度為?33ug/125ul=0.264ug/ul。

siRNA-mate plus轉(zhuǎn)染試劑盒（siRNA/miRNA通用型）細(xì)胞轉(zhuǎn)染操作流程
（以24孔板單孔轉(zhuǎn)染15pmol siRNA為例，不考慮移液損耗）

?細(xì)胞鋪板
轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)前一天，用胰蛋白酶消化，調(diào)整細(xì)胞濃度并計(jì)數(shù)。將細(xì)胞在24孔板中鋪板，置于37℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過(guò)夜。實(shí)驗(yàn)當(dāng)天轉(zhuǎn)染時(shí)的細(xì)胞匯合度達(dá)到60% 左右時(shí)進(jìn)行轉(zhuǎn)染為佳。建議通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)確定不同細(xì)胞的最佳轉(zhuǎn)染密度。
?siRNA預(yù)混液制備
取Buffer 8.5μL置于無(wú)菌無(wú)酶EP管中，加入15pmol siRNA（若siRNA原液濃度20μM，取0.75μL），吹打混勻，即得 siRNA預(yù)混液。
注：請(qǐng)確保siRNA原液的溶劑為無(wú)酶水，且濃度不低于10μM。
不得使用PBS或培養(yǎng)基稀釋siRNA原液，請(qǐng)確保稀釋得到的siRNA預(yù)混液濃度為1.5pmol/μL（1.5μM）左右。
?siRNA/plus復(fù)合物制備
向上述EP管中，每管siRNA預(yù)混液加入1.5μL（或3μL）plus轉(zhuǎn)染試劑，立即用移液槍吹打數(shù)十次進(jìn)行混勻，即得siRNA/plus復(fù)合物。
注：siRNA/plus復(fù)合物盡快加入到細(xì)胞中。如特殊情況，在室溫條件下存放不要超過(guò)8小時(shí)，請(qǐng)勿將siRNA/plus復(fù)合物置于冷凍條件。
?加樣
將制得的siRNA/plus復(fù)合物加至細(xì)胞中，輕輕晃動(dòng)24孔板使分散均勻（前后和左右方向各晃動(dòng)十多次）。放回培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)實(shí)驗(yàn)安排進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
注：培養(yǎng)基是完培，可以含有雙抗和血清
?檢測(cè)
轉(zhuǎn)染后24、48小時(shí)兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)基因水平變化，48、72小時(shí)檢測(cè)蛋白水平變化。不同基因的半衰期是不同的，siRNA干擾是拋物線形的，多做幾個(gè)時(shí)間點(diǎn)有利于siRNA干擾效果的測(cè)定

適用范圍
siRNA- mate plus 轉(zhuǎn)染試劑盒（siRNA/miRNA通用型）適用于絕大多數(shù)真核細(xì)胞siRNA/miRNA體外轉(zhuǎn)染。
本產(chǎn)品僅供研究使用。

運(yùn)輸和保存
常溫運(yùn)輸。2℃~8℃保存，有效期一年。不得冷凍！

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使用GP-transfect-Mate??轉(zhuǎn)染RNA Oligo進(jìn)入哺乳動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，遵從以下一般性指導(dǎo)：

為了獲得最佳基因阻斷結(jié)果，每一種細(xì)胞系轉(zhuǎn)染siRNA或miRNA的量都需要經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)確定。如果您是首次轉(zhuǎn)染您的細(xì)胞系，推薦嘗試使用幾個(gè) 轉(zhuǎn)染試劑-Mate的濃度，并在1-100nM范圍內(nèi)改變siRNA或miRNA的濃度，以確定達(dá)到最佳基因阻斷水平所需要的條件。高濃度的siRNA或miRNA可能具有細(xì)胞系依賴性。

推薦在50％z左右細(xì)胞匯合度時(shí)進(jìn)行轉(zhuǎn)染。通常基因阻斷的分析至少要在轉(zhuǎn)染后24-72小時(shí)進(jìn)行。低密度轉(zhuǎn)染細(xì)胞可以使由于細(xì)胞過(guò)度生長(zhǎng)造成的細(xì)胞活性損害減少到最低。?GP-transfect-Mate?極低的細(xì)胞毒性可以方便研究者根據(jù)目的細(xì)胞生長(zhǎng)特性，靶基因的表達(dá)特性，選擇適合條件進(jìn)行轉(zhuǎn)染。

通過(guò)合適的FAM-NC、陽(yáng)性對(duì)照優(yōu)化轉(zhuǎn)染和檢測(cè)條件。可以使用吉瑪熒光標(biāo)記的陰性對(duì)照序列（根據(jù)目的RNA oligo類型，請(qǐng)選擇對(duì)應(yīng)的對(duì)照。Cat. No.　A07001, B04004, B04005, B04006）幫助優(yōu)化細(xì)胞系的轉(zhuǎn)染條件。一旦確定了用來(lái)轉(zhuǎn)染的最佳條件，推薦在每一次實(shí)驗(yàn)都包括熒光標(biāo)記的陰性對(duì)照序列，作為轉(zhuǎn)染效率的指示劑。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞，看家基因是較好的陽(yáng)性對(duì)照（Cat. No.　A08005, A08008）。將不同濃度的陽(yáng)性對(duì)照的siRNA轉(zhuǎn)入靶細(xì)胞（同樣適合實(shí)驗(yàn)靶siRNA），轉(zhuǎn)染48小時(shí)后統(tǒng)計(jì)對(duì)照蛋白或mRNA相對(duì)于未轉(zhuǎn)染細(xì)胞的降低水平。過(guò)多的siRNA將導(dǎo)致細(xì)胞毒性以至死亡。

避免RNA酶污染。微量的RNA酶將導(dǎo)致siRNA/miRNA實(shí)驗(yàn)失敗。由于實(shí)驗(yàn)環(huán)境中RNA酶普遍存在，如皮膚，頭發(fā)，所有徒手接觸過(guò)的物品或暴露在空氣中的物品。因此保證實(shí)驗(yàn)每個(gè)步驟不受RNA酶污染非常重要。尤其直接接觸Oligo原液的槍頭、Tube，請(qǐng)務(wù)必保證RNase free。我們推薦商業(yè)化的RNase free的槍頭及Tubes。

健康的細(xì)胞培養(yǎng)物和嚴(yán)格的操作確保轉(zhuǎn)染的重復(fù)性。通常，健康的細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率較高。此外，較低的傳代數(shù)能確保每次實(shí)驗(yàn)所用細(xì)胞的穩(wěn)定性。為了優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，推薦用50代以下的轉(zhuǎn)染細(xì)胞，否則細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率會(huì)隨時(shí)間明顯下降。

目的檢測(cè)時(shí)間點(diǎn)。細(xì)胞轉(zhuǎn)染后，不同細(xì)胞和RNA效率存在差異。一般來(lái)說(shuō)，在mRNA水平觀察RNAi效果的最佳時(shí)間是轉(zhuǎn)染后24-48小時(shí)，在蛋白水平觀察RNAi效果的最佳時(shí)間是轉(zhuǎn)染后48-72小時(shí)。siRNA干擾是拋物線形的，不同基因的半衰期是不同的，多做幾個(gè)時(shí)間點(diǎn)有利于siRNA干擾效果的測(cè)定。

轉(zhuǎn)染操作注意：將siRNA/miRNA oligo—GP-transfect-Mate復(fù)合物逐滴均勻滴加到每一個(gè)包含細(xì)胞和培養(yǎng)基的孔中。均勻滴加后可以輕輕地前后搖動(dòng)培養(yǎng)板混合均勻。

GP-transfect-Mate?操作流程（24?孔板）

以24 孔板為例，若要檢測(cè)基因沉默或者過(guò)表達(dá)效果，推薦最低RNA oligo終濃度為50nM ，（DNA為0.5~1.5μg）；遵循以下操作方法可以高效地將RNA? oligo或者DNA轉(zhuǎn)染貼壁和懸浮培養(yǎng)的多種真核細(xì)胞。但是對(duì)某些特殊的細(xì)胞系和培養(yǎng)條件，或特殊應(yīng)用等，也需要單獨(dú)特別優(yōu)化，請(qǐng)參考表 1、表2。

1.?細(xì)胞鋪板

轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度：一般來(lái)說(shuō)，當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到60%～80%時(shí)進(jìn)行轉(zhuǎn)染可以取得較高的轉(zhuǎn)染效率(參見表1)。然而，不同細(xì)胞的最適轉(zhuǎn)染密度都不盡相同，因此在初次轉(zhuǎn)染某種細(xì)胞時(shí)，可以通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)先確認(rèn)該細(xì)胞最佳的轉(zhuǎn)染密度。

2.?轉(zhuǎn)染復(fù)合物的制備

（1）將 GP-transfect-Mate轉(zhuǎn)染試劑放置于室溫中，使用前輕輕混勻。

（2）在1.5 ml無(wú)菌離心管中加入50 μl無(wú)血清培養(yǎng)基或 OPTI-MEM，并添加適量的轉(zhuǎn)染試劑(參見表2)，用移液器輕輕混勻，室溫靜置5 min。

（3）同時(shí)在另一1.5 ml無(wú)菌離心管中加入50 μl無(wú)血清培養(yǎng)基或 OPTI-MEM，并添加適量的RNA oligo/DNA (參見表2)，用移液器輕輕混勻，室溫靜置5 min。

（4）將GP-transfect-Mate-培養(yǎng)基混合物滴加至RNA oligo/DNA-培養(yǎng)基混合物中，用移液器輕輕混勻，室溫靜置15-20 min 后，立即轉(zhuǎn)染。

注：復(fù)合物盡量在60 min內(nèi)使用，并且GP-transfect-Mate-培養(yǎng)基混合物和RNA oligo/DNA-培養(yǎng)基混合物的混合次序非常重要，切勿顛倒。

3.?轉(zhuǎn)染過(guò)程

（1）趁靜置時(shí)，給 24 孔板換液，每孔換上 0.4ml 預(yù)熱的新鮮培養(yǎng)基。

（2）將 100 μl 轉(zhuǎn)染混合物加入孔中，終體系為500 μl。加完后將板輕輕晃動(dòng)以使復(fù)合物均勻分布。

（3）37℃靜置培養(yǎng)細(xì)胞，4-6h換成完全培養(yǎng)基。24-72 h檢測(cè)mRNA表達(dá)，48-96 h檢測(cè)蛋白表達(dá)。

適用范圍

293T, A549, Beas-2B,HeLa,ECA-109,Raw264.7,A375,CAFs,HCT116,HT29,LMH,NE-4C,MGC803，PC-3, PC-12，MCF-7,C6等細(xì)胞。

表?1:?貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞接種數(shù)量、培養(yǎng)基體積

注：貼壁細(xì)胞培養(yǎng)密度取決于培養(yǎng)器皿的表面積，而懸浮細(xì)胞則由培養(yǎng)基的體積決定。

表?2?不同培養(yǎng)板轉(zhuǎn)染DNA/RNA??oligo的推薦轉(zhuǎn)染條件

注：GP-transfect-Mate轉(zhuǎn)染試劑的用量在此范圍內(nèi)進(jìn)行優(yōu)化。

產(chǎn)品說(shuō)明書

相關(guān)文獻(xiàn)

1.La X, Zhang L, Li Z, Yang P, Wang Y. Berberine-induced autophagic cell death by elevating GRP78 levels in cancer cells. Oncotarget. 2017 Mar 28; 8(13): 20909-24.

2.Chen JF, Wu QS, Xie YX, Si BL, Yang PP, Wang WY, Hua Q, He Q. TRAP1 ameliorates renal tubulointerstitial fibrosis in mice with unilateral ureteral obstruction by protecting renal tubular epithelial cell mitochondria. The FASEB Journal. 2017 Jul.

3.Huang Z, Li S, Fan W, Ma Q. Transforming growth factor β1 promotes invasion of human JEG-3 trophoblast cells via TGF-β/Smad3 signaling pathway. Oncotarget. 2017 May 16; 8(20): 33560-70.

4.Tan J, Yang L, Liu C, Yan Z. MicroRNA-26a targets MAPK6 to inhibit smooth muscle cell proliferation and vein graft neointimal hyperplasia. Scientific Reports. 2017 Apr; 7: 46602. LINK133\\\\\\\'>Oncotarget. 2017 May 16; 8(20): 33560-70.

5.Wu R, Li X, Xu P, Huang L, Cheng J, Huang X, Jiang J, Wu LJ, Tang Y. TREM2 protects against cerebral ischemia/reperfusion injury. Molecular Brain. 2017 Jun 7; 10(1): 20. LINK133\\\\\\\'>Oncotarget. 2017 May 16; 8(20): 33560-70.

6.Fu J, Xia X, Liu Z, Wang YW, Wang YX, Shi Q, Song X, Song E, Song Y. The acute exposure of tetrachloro-p-benzoquinone (aka chloranil) triggers inflammation and neurological dysfunction via Toll-like receptor 4 signaling: The protective role of melatonin preconditioning. Toxicology. 2017 Apr 15; 381: 39-50.

7.Gao R, Chen R, Cao Y, Wang Y, Song K, Zhang Y, Yang J. Emodin suppresses TGF-β1-induced epithelial-mesenchymal transition in alveolar epithelial cells through Notch signaling pathway. Toxicology and Applied Pharmacology. 2017 Mar 1; 318: 1-7. r 15; 381: 39-50.

8.Chen H, Lv M, Lv Z, Li C, Zhang W, Zhao X, Duan X, Jin C, Xiong J, Xu F, Li Y. Divergent roles of three cytochrome c in CTSB-modulating coelomocyte apoptosis in Apostichopus japonicus. Developmental & Comparative Immunology. 2017 Nov; 76: 65-76 ; 381: 39-50.

9.Yang H, Ma L, Wang Y, Zuo W, Li B, Yang Y, Chen Y, Chen L, Wang L, Zhu L. Activation of ClC‐3 chloride channel by 17β‐estradiol relies on the estrogen receptor α expression in breast cancer. Journal of Cellular Physiology. 2017 Jun.

10.Li L, Li X J, Wu YM, Yang L, Li W, Wang Q. Vitellogenin regulates antimicrobial responses in Chinese mitten crab, Eriocheir sinensis. Fish & Shellfish Immunology. 2017 Oct; 69: 6-14. ?

訂購(gòu)須知

目錄分類 本商品目錄中的產(chǎn)品介紹按以下內(nèi)容分類：

1. RNA干擾研究工具
2. MicroRNA研究工具?

產(chǎn)品價(jià)格 本產(chǎn)品目錄中標(biāo)示的價(jià)格均為國(guó)內(nèi)統(tǒng)一零售參考價(jià)，全部為人民幣價(jià)格。如果大量定購(gòu)時(shí)，在標(biāo)準(zhǔn)價(jià)格的基礎(chǔ)上有不同程度的優(yōu)惠。?

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