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公司產品
miRNA抑制劑
有效的抑制內源性成熟miRNA功能,21-23 nt 2’-甲氧修飾的RNA寡核酸設計
產品特點：
1、有效的抑制內源性成熟miRNA功能
2、21-23 nt 2’-甲氧修飾的RNA寡核酸設計3、較低的濃度就能高效長久的抑制miRNA活性
4、GMR-miRTM microRNA Inhibitors 是單鏈的化學修飾的增強型寡核苷酸對sanger miRNA 數據庫:http://microrna.sanger.ac.uk中所有人、小鼠以及大鼠miRNA有效
GMR-miRTM microRNA inhibitors的應用：
1、利用GMR-miRTM microRNA inhibitors抑制活體microRNA活性來研究Loss-of-function效應
2、篩選調控基因表達和影響細胞發育過程的miRNAs3、深入研究miRNA在一些生物過程中的作用，如細胞的發育、增殖、分化和凋亡
4、發現和驗證內源性的miRNA target
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目錄號 |
產品名稱 |
規格（OD） |
純化方式 |
價格 |
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B03001 |
GMR-miRTM?microRNA inhibitors |
2 |
HPLC |
￥350 |
miR-21 inhibitors 實驗設計 ，常規Anti-miR-21設計（2’OMe）:
As-miR-21: 5’-UCAACAUCAGUCUGAUAAGCUA-3’
NC：5’-UUGUACUACACAAAAGUACUG-3’
NC-FAM：5’- FAM-UUGUACUACACAAAAGUACUG-3’
全鏈2’-O-Me修飾。?
二、實驗方案?
1. 細胞培養?
293T，A549
7* 10cm dish細胞?
Lipofectamin 2000：250ul
Ezol：50ml
Hairpin-it miR-21 qPCR kit (300runs)：1個?
2. 轉染效率評價?
A549細胞接種于24孔板，轉染Inhibitor-NC FAM優化轉染試劑與inhibitor的濃度配比，轉染4-6h，熒光顯微鏡觀察轉染效率，確定最佳轉染條件：
1. Inhibitor：25nM Lipo：1ul?
2. Inhibitor：25nM Lipo：2ul
3. Inhibitor：50nM Lipo：1ul?
4. Inhibitor：50nM Lipo：2ul
5. Inhibitor：100nM Lipo：1ul?
6. Inhibitor：100nM Lipo：2ul
b. miRNA inhibitor轉染
inhibitor 3個濃度梯度：25nM，50nM，100nM；NC選擇100nM轉染。
| MicroRNA Inhibitor介紹 |
| MicroRNA Inhibitor是用來抑制內源性的MicroRNA的功能。特異的MicroRNA inhibitor能夠被導入到表達特異的microRNA的細胞內，抑制MicroRNA的作用，也可以用來抑制表達特異的內源性的miRNA的報告載體的表達。 |
| 抑制特異性的內源性的miRNA |
| 為了分析miRNA對生物過程和內源性的靶的作用效果，miRNA inhibitor 能夠被轉染入細胞評價此效應能否被逆轉。 |
| 轉染程序 |
| 轉染效率對不同的細胞株和不同的轉染試劑是不同的。我們建議miRNA inhibitor 的終濃度為15-100nM |
| 最優化的轉染濃度最終還是需要通過試驗來確定。我們發現典型的試驗中最佳的濃度范圍是15-100nM，但是優化的濃度范圍我們設定在1-100nM之間。 |
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96孔板 | 24孔板 | 12孔板 | |
轉染試劑A |
0.3-1.0 ul |
1-3 ul |
2-4 ul |
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MicroRNA inhibitor B |
3 pmol |
15 pmol |
30 pmol |
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Cell density C |
6000 cells/well |
40,000 cells/well |
80,000 cells/well |
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Final volume per well |
0.1 ml |
0.5 ml |
1.0 ml |
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A：轉染試劑的推薦量，根據您訂購的試劑不同應做適當的調整 |
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| 轉染優化 | ? | |||
? 優化轉染效率是使得miRNA inhibitor 活性最大化的的最關鍵的一個因素之一，對每種轉染試劑而言，首先要確定一款最合適的轉染試劑，主要看從以下幾點著手處理： 1、轉染試劑的量 2、MicroRNA inhibitor的量 3、轉染時的細胞密度 4、轉染時候的操作順序 5、細胞與轉染試劑/siRNA復合物的接觸時間 |
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1. RNA干擾研究工具
2. MicroRNA研究工具
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