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全基因合成
與傳統(tǒng)的從生物體的核酸(基因組DNA或mRNA)釣取方法相比,人工合成全基因有以下優(yōu)點:
(1)合成周期短,還可以保證序列100%正確無誤;
(2)可以對密碼子進行優(yōu)化,以提高基因的表達效率;由于每個物種偏愛的編碼子不同,當(dāng)異源蛋白在 E.coli 里表達時,有些蛋白很難得到高表達。如果將真核生物偏愛的密碼子改為原核生物偏愛的密碼子,就可以實現(xiàn)真核生物的基因的高效表達;
(3)當(dāng)只知道某一蛋白或多肽的氨基酸序列而不知其核苷酸序列時,也可以通過人工合成基因的方法進行克隆和表達;
(4)可根據(jù)需要進行基因的定點突變以改造基因;
(5)研究人員根據(jù)自己的意愿設(shè)計得到自然界中很難獲得甚至不存在的基因。
吉瑪全基因合成服務(wù)流程:
1. 當(dāng)客戶提供DNA或者氨基酸序列或者基因ID號時,我們將根據(jù)客戶的要求對提供的序列進行分析,為客戶提供免費基因設(shè)計服務(wù),最終序列經(jīng)客戶確認后作為基因合成的基本信息。根據(jù)最終序列的具體情況設(shè)計合成方案,通過業(yè)務(wù)員或技術(shù)員給客戶做出報價。
2. 與客戶達成一致意見后,簽訂基因合成服務(wù)協(xié)議和保密合同,客戶交納相應(yīng)預(yù)付款。預(yù)付款到賬即為基因合成開始期限,我們將立即進行單鏈 Oligo 合成、DNA片段拼接等工作,然后把全長基因克隆于載體中,再通過DNA測序確認合成基因的正確性。
3. 測序結(jié)果如果發(fā)現(xiàn)有錯誤位點,我們會采取相應(yīng)的技術(shù)手段進行修復(fù)校對,保證整個序列的正確性。
4. 提供實驗結(jié)果:包括測序彩色峰圖、含有目的基因的重組質(zhì)粒及含該質(zhì)粒的甘油菌等。
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吉瑪全基因合成交貨期限及收費標(biāo)準(zhǔn):
基因全長(bp) | 交貨期限(工作日) | 價格(¥) |
≤500 | 7-10 | 1000元 |
500-3,000 | 10-30 | 2元/bp |
3,000-6,000 | 30-40 | 3元/bp |
≥6,000 | 每增加1Kb增加5-10個工作日 | 4元/bp |
特殊序列 | 協(xié)商 | 協(xié)商 |
備注:1)小于300bp的基因,統(tǒng)一按300bp收費;2)以上基因均指構(gòu)建到克隆載體pUC57中;如需構(gòu)建表達載體或客戶提供載體需額外加收1000元;3)基因結(jié)構(gòu)復(fù)雜(如:10bp以上的重復(fù)序列;8bp以上的同一堿基的連續(xù)結(jié)構(gòu);GC含量超過70%等)時需視具體情況另行協(xié)商收費標(biāo)準(zhǔn)。4)如需空載體對照200元/20ug?;
吉瑪全基因合成真核過表達載體類型
目錄號 | 產(chǎn)品名稱 | 啟動子 | 熒光標(biāo)簽 | 真核抗性 | 原核抗性 |
C05001 | pEX-1(pGCMV/MCS/EGFP/Neo) | CMV | EGFP | Neo | Kan |
C05002 | pEX-2(pGCMV/MCS/IRES/EGFP/Neo) | CMV | EGFP | Neo | Kan |
C05003 | pEX-3(pGCMV/MCS/Neo) | CMV | -- | Neo | Kan |
C05004 | pEX-4(pGCMV/MCS/T2A/EGFP/Neo) | CMV | EGFP | Neo | Kan |
C05005 | pEX-5(pGCMV/EGFP/MCS/Neo) | CMV | EGFP | Neo | Kan |
C05006 | pEX-6(pGCMV/MCS/RFP/Neo) | CMV | RFP | Neo | Kan |
C05007 | pEX-7(pGCMV/RFP/MCS/Neo) | CMV | RFP | Neo | Kan |
吉瑪全基因合成真核過表達載體圖譜:
1、我公司用于基因合成的標(biāo)準(zhǔn)克隆載體為pUC57,如需克隆到指定的載體中,則該載體應(yīng)由您提供,我公司將以最優(yōu)惠的價格幫您完成,每次亞克隆需增加五個工作日,并在結(jié)算時按克隆難易程度收取1000元的亞克隆費用。我們提供的甘油菌一般為Top10菌株。
2、若需要提供密碼子優(yōu)化服務(wù),請注明需要優(yōu)化,并提供給如下訊息:(1) 需要合成的蛋白序列或DNA序列;(2) 宿主表達系統(tǒng);(3) 兩端的限制性酶切位點,優(yōu)化后的序列中需要避免的限制性酶切位點;(4) 優(yōu)化后的序列中需要保留的限制性酶切位點。
3、服務(wù)協(xié)議簽訂之后,您不得隨意更改基因序列;在基因合成的過程中,我公司會在每周五的時候向您報告基因合成的進展情況。
4、為您提供的產(chǎn)品和技術(shù)資料包括:(1) 不少于50ug的含目的基因的重組質(zhì)粒一份;(2) 含上述重組質(zhì)粒的甘油菌一份;(3) 基因序列100%正確的原始測序報告電子版一份和序列比對文件;(4) 基因合成報告單一份等。
5、我公司承諾:對客戶的基因序列不做任何形式的擴散、開發(fā)或利用,對相關(guān)信息實行完全保密,公司提交產(chǎn)品一個月后,即徹底銷毀所有相關(guān)的引物、質(zhì)粒和菌種。
以化學(xué)合成DNA oligo為基礎(chǔ),人工合成目的基因的過程。
全基因合成優(yōu)勢
(1)合成周期短,還可以保證序列100%正確無誤。(2)可以對密碼子進行優(yōu)化,以提高基因的表達效率。(3)當(dāng)只知某一蛋白或多肽的氨基酸序列而不知其核苷酸序列時,也可以通過人工合成基因的方法進行克隆和表達。(4)可根據(jù)需要進行基因的定點突變以改造基因。(5)研究人員根據(jù)自己的意愿設(shè)計得到自然界中很難獲得甚至不存在的基因。
產(chǎn)品種類
< GPS 1-1 化學(xué)合成基因>
< GPS 2-1 基因定點突變>
< GPS 2-2 目的基因的獲取及其克隆>
< GPS 2-3 密碼子優(yōu)化和基因設(shè)計服務(wù)>
< GPS 2-4 質(zhì)粒提取服務(wù)>
出貨提供產(chǎn)品及數(shù)據(jù)資料包括:
1) 高純度質(zhì)粒, 大約 10~50ug DNA;
2)含有重組質(zhì)粒的甘油菌液(500ul);
3)測序原始圖譜、序列及載體圖譜;
4)全基因合成報告單 ;
5)備注:通常不提供合成的具體方法和實驗步驟;如必須提供則200元/份。
GenePharma 基因合成報告單模板
工作編號:xxxx
客戶姓名 |
xxx |
基因名稱 |
xxx |
基因長度 |
xxxbp |
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克隆載體 |
xxx |
克隆位點 |
xxx/xxx |
宿主菌 |
Top10 |
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交付材料 |
技術(shù)資料 |
測序報告正本壹份(電子版) |
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比對圖譜壹份(電子版) |
√ |
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質(zhì)粒 |
壹份,DNA含量≈50μg (xxx) |
√ |
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菌株 |
含合成基因重組質(zhì)粒的甘油菌(xxx) 500μl |
√ |
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客戶注意事項 |
客戶接到本公司合成的合同基因后,如對結(jié)果有疑問,請在本報告單簽發(fā)之日起一個月內(nèi)與本公司取得聯(lián)系。一個月后本公司將根據(jù)合同銷毀封存的各種資料和質(zhì)粒,不再受理客戶的任何申訴。 |
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報告簽發(fā) |
簽發(fā)人 |
xxx |
簽發(fā)日期 |
xxxx |
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基因簽收 |
簽收人 |
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簽收日期 |
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注意事項
GenePharma所提供的質(zhì)粒為液體質(zhì)粒,可以直接用于細胞轉(zhuǎn)染及其他分子生物學(xué)實驗。如果用戶在使用過程中發(fā)現(xiàn)質(zhì)粒的細胞毒性較大,可以通過其他方法制備更高純度的質(zhì)粒。
甘油菌液為載體的過夜培養(yǎng)物與甘油的混合物,甘油的終濃度為20%。在4℃可保存2周,在-20℃可保存2個月,在-80℃可長期保存。
運輸溫度:常溫。用戶收到試劑盒后,應(yīng)根據(jù)相應(yīng)的條件保存各組分。
使用方法
1.Lei Xi? Meixi Peng Shuiqing Liu et al. Hypoxia-stimulated ATMactivation regulates autophagy-associated exosome release from cancer-associated ibroblasts to promote cancer cell invasion. Journal of Extracellular Vesicles 2021 Sep;10(11):e12146
2.Hongwei Su1, Tao Tao, Zhao Yang et al. Circular RNA cTFRC acts as the sponge of MicroRNA-107 to promote bladder carcinoma progression. Molecular Cancer? ? ? ? ? ?(2019) 18:27 https://doi.org/10.1186/s12943-019-0951-0.
3. Jing Zhang, Lidan Hou, Rui Liang et al. CircDLST promotes the tumorigenesis and metastasis of gastric cancer by sponging miR-502-5p and activating the NRAS/MEK1/ERK1/2 signaling. Molecular Cancer (2019) 18:80? ?https://doi.org/10.1186/s12943-019-1015-1.
4. Hang Song, Ji Ma1, Zhixuan Bian et al. Global pro?ling of O-GlcNAcylated and/or phosphorylated proteins in hepatoblastoma. Signal Transduction and Targeted Therapy 2019 Oct 11;4:40.
5. Wei Xu, Si-Da Han, Can Zhang et al. The FAM171A2 gene is a key regulator of progranulin expression and modifies the risk of multiple neurodegenerative diseases. SCIENCE ADVANCES 2020 Oct 21;6 : eabb3063.
6.Liang Wang1,2, Jing Yang1, He-nan Wang et al. LncRNA BCYRN1-induced autophagy enhances asparaginase resistance in extranodal NK/T-cell lymphoma. Theranostics 2021 Jan 1; 11(2): 925-940.
7. Su-Jie Ni, Li-Qin Zhao, Xiao-Feng Wang et al. CBX7 regulates stem cell-like properties of gastric cancer cells via p16 and AKT-NF-κB-miR-21 pathways. Journal of Hematology & Oncology 2018 Feb 8; 11:17.
8. Jian Chen, Jiali Jin, Xi Zhang et al. Microglial lnc-U90926 facilitates neutrophil in?ltration in ischemic stroke via MDH2/CXCL2 axis. Molecular Therapy 2021 Apr 19; 29 No 9.
9.Zhonglin Zhu, Zeyin Rong, Zai Luo et al. Circular RNA circNHSL1 promotes gastric cancer progression through the miR-1306-3p/SIX1/vimentin axis. Molecular Cancer 2019 Aug 22; 18: 126
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目錄分類 本商品目錄中的產(chǎn)品介紹按以下內(nèi)容分類:
1. RNA干擾研究工具
2. MicroRNA研究工具
產(chǎn)品價格 本產(chǎn)品目錄中標(biāo)示的價格均為國內(nèi)統(tǒng)一零售參考價,全部為人民幣價格。如果大量定購時,在標(biāo)準(zhǔn)價格的基礎(chǔ)上有不同程度的優(yōu)惠。
全基因過表達載體(mRNA, lncRNA):
1. 基因合成費用1.5*基因長度+1000;
2. 序列超過3kb,或特殊序列高GC重復(fù)序列等特殊詢價周期
3. 我們確保將客戶指定序列構(gòu)建正確(有測序結(jié)果證實,對于高GC重復(fù)序列可能會有缺失,評估后都會予以說明),如有缺失會免費重復(fù)修復(fù)一次。保證在工具細胞293T中RNA水平上調(diào)2倍。不保證蛋白及其他功能結(jié)果。與其他基因融合表達不保證表達基因效果。
4. 如果經(jīng)過公司293T驗證有上調(diào)表達顯著差異(qPCR),并提供PDF版本驗證結(jié)果(驗證結(jié)果產(chǎn)權(quán)不屬與客戶),客戶如需驗證結(jié)果完整服務(wù)報告,需要另行支付驗證費用3000元,并支付前期貨款,收到貨款后提交全部原始結(jié)果。如果驗證無效,可以免費重新構(gòu)建一次或退票退款或做預(yù)付款。如果再次無效則不再免費重新轉(zhuǎn)錄,已經(jīng)付款做預(yù)付款處理。
全基因過表達載體(circRNA):
1.?構(gòu)建費用2*基因長度,低于2000元的按照2000計算;
2.?序列超過3kb,或特殊序列高GC重復(fù)序列等特殊詢價周期12-25個工作日
3.?我們確保將客戶指定序列構(gòu)建正確(有測序結(jié)果證實,對于高GC重復(fù)序列可能會有缺失,評估后都會予以說明),對于成環(huán)效果,不予保證。如果客戶檢測無效且已付款,我們可以免費重新更換一次側(cè)翼序列重新構(gòu)建一次。如果再次無效則不再免費重做。
4.?如需驗證費用另計:一條目的circRNA和對照轉(zhuǎn)染工具細胞293T,陽性和對照及空白細胞3個樣品驗證環(huán)化表達效率并測序過表達組環(huán)化序列,費用5000~6000元,預(yù)付50%啟動實驗,無效只收預(yù)付款)。
質(zhì)量保證 凡吉瑪公司的產(chǎn)品均有嚴格的質(zhì)量保證。如果我們發(fā)現(xiàn)確實存在質(zhì)量問題時,保證更換產(chǎn)品。如果在到貨后一個月之內(nèi)用戶無提出異議,我們將視本產(chǎn)品為優(yōu)良產(chǎn)品而不再受理索賠事宜。提出產(chǎn)品異議(或索賠)時,切莫在產(chǎn)品使用完(或快使用完)后提出,以備本公司回收產(chǎn)品,確認產(chǎn)品質(zhì)量。如果因為您訂錯制品需要退貨時,請務(wù)必在三天內(nèi)退貨。同時請您千萬不要拆開包裝,拆封后的產(chǎn)品不再受理退貨事宜。發(fā)生索賠事宜時,公司只保證在產(chǎn)品價格額度范圍之內(nèi)酌情賠償,恕不受理超過制品價格額度以上之部分。
上海公司的聯(lián)絡(luò)方式如下:
公司名稱:上海吉瑪制藥技術(shù)有限公司
地址:上海市浦東新區(qū)哈雷路1011號9幢602室
郵編:201203
電話:021-51320195,021-51370738,021-51370739,4006900195
E-mail:order@genepharma.com(產(chǎn)品訂購)support@genepharma.com(技術(shù)支持)
上海、南京、浙江、安徽、云南、山東、福建、重慶、四川、貴州、西藏、陜西、甘肅、寧夏、新疆、青海、河南、山西、香港、澳門、臺灣以及其他境外客戶訂貨地區(qū)請聯(lián)系上海公司
蘇州公司的聯(lián)絡(luò)方式如下:
公司名稱:蘇州吉瑪基因股份有限公司
地址:蘇州工業(yè)園區(qū)東平街199號
郵編:215123
電話:0512-86668828
E-mail:szorder@genepharma.com(產(chǎn)品訂購)szsupport@genepharma.com(技術(shù)支持)
北京、河北、內(nèi)蒙古、天津、武漢、江西、黑龍江、吉林、遼寧、湖北、湖南、廣東、江蘇(除南京)、廣西、海南訂貨地區(qū)請聯(lián)系蘇州公司
下單前請務(wù)必核對訂購表客戶信息和訂購內(nèi)容無誤,訂單一經(jīng)確認,當(dāng)天即啟動生產(chǎn)。 超過當(dāng)日17:00后不能修改或者取消,如果需要取消訂單,由此產(chǎn)生的費用,將由客戶承擔(dān)。
【取消訂單費用規(guī)則】
(1)當(dāng)日17:00前,免費修改或取消。
(2)當(dāng)日17:00到次日17:00前,按該項產(chǎn)品金額的50%收取。
(3)次日17:00后,按該項產(chǎn)品金額的100%收取。